新疆绵羊群体对绵羊慢病毒的品种敏感性研究

发布: 2010-04-03 |  作者: 邓普辉等 |   来源: 《中国兽医杂志》

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    不同品种的绵羊对绵羊慢病毒(Ovine lentivirus, OvLV)的敏感性程度取决于绵羊的品种OvLV的毒力(强度株、弱毒株)。对某一毒力已知的病毒株的敏感程度,则取决于绵羊的品种,称为品种敏感性(敏感品种、低敏感性品种)。OvLV的品种敏感性历来受到研究者的重视。本课题组从1976年开始对新疆绵羊群体中的OvLV感染进行研究,时间长达25年,先后获得3次国家自然科学基金资助。下面是对25年工作的简要介绍。

 

1   粗毛和半粗毛羊OvLV引起的传染病有多种地方名称,但以梅迪(maedi)和绵羊进行性肺炎(Ovine progressive pneumonia,OPP)最为常用。梅迪为冰岛语,意为呼吸困难,其病原为梅迪维斯纳病毒(maedivisna virus, MVV),MVV为OvLV的冰岛株,强毒型,主要流行于欧洲;绵羊进行性肺炎的病原为OPPV,系OvLV的美国株,为弱毒株,流行于美国。

 

1.1 边莱羊

   

    南疆的和田是传统的地毯产地,和田羊(粗毛羊)的羊毛是织毯原料。为了改良和田羊,1966年和1967年先后从澳大利亚引进边区莱斯特(Border Leicester)羊(边莱羊),1967年起在当年的羔羊中发生一种“肺脓肿病”,发病率约为20%,均以死亡告终1976年、1978-1980年两次对受感染的羊场进行调查,共选出有呼吸症状的患羊51例。第1次调查的病羊26例,其中边莱羊24例(包括4月龄羔羊2例)、杂种羊2例,症状为呼吸困难与进行性消瘦,病程从4个月到4年以上。病理组织学检查证实OPP 17例(其中羔羊1例),OPP并发SPA(绵羊肺腺瘤病)5例。OPP病例中有1例并发脑炎。48%的病例并发肺脓肿。第2次调查的病羊为25例,年龄1~9岁,绝大多数为边莱羊,少数为杂种。经病理组织学检查确诊出SPA 2例、OPP 7例、OPP并发SPA 3例,40%的病例并发肺脓肿。两次调查中OPP的发生率为63%(32/51),其中8例并发SPA。32例OPP中,28例肺有眼观变化,其中2例为气肿型,26例为实变(肺炎)型,病理组织学上为典型的淋巴组织样间质性肺炎(lymphoid interstitial pneumonia, LIP。血清学调查表明,边莱羊的阳性率最高(44%)。由于边莱羊患有明显的呼吸症状(与消瘦)、肺有明显的眼观变化与LIP(特异性病变)、血清学阳性率高等,因此边莱羊是对OvLV的敏感品种。澳大利亚历来是没有OvLV感染的国家,因此引进的边莱羊不可能携带OvLV。当新引进的敏感品种边莱羊与当地业已存在的OvLV接触,立即暴发疾病。随着时间的推移,边莱羊逐渐与病毒相适应,疾病也转为亚临床感染,但仍保持高血清学阳性率,此时感染羊不出现呼吸症状和肺特异性病变(LIP),体内惟一的特异性病变为硬化性淋巴细胞性乳腺炎;纵然血清学转阴2年后,乳腺炎仍然存在。1978年用14例病羊肺实变组织分别接种绵羊脉络丛和绵羊胎肺细胞单层,发现有合胞体形成1例的细胞表面有病毒出芽,但未确定所分离到病毒为OvLV。1988年以血清学阳性羊的外周血白细胞膜层接种绵羊胎肺与鼻甲细胞单层1盲传2至3代后出现明显的CPE(多核性合胞体形成),电镜检查在细胞浆内有病毒颗粒形成与细胞表面有病毒出芽。培养液用生物素亲和素酶联免疫吸附试验(BASELISA)的双抗夹心法检测为阳性,证明已分离到OvLV。

 

1.2  和田羊 

    

     和田羊为粗毛羊(地毯毛羊),分布于和田地区。血清学调查表明和田羊的阳性率低(3%);血清学转阴3年以上者仍有特异性病变硬化性淋巴细胞性乳腺炎存在,没有相关的临床症状,因此和田羊属于对OvLV的低敏感性品种。但在边莱公羊与和田母羊进行级进杂交时,杂交3代的羊毛品质已从和田羊的粗毛变为接近边莱羊的半粗毛,血清学阳性率也从和田羊的3%增高至11%。

 

2  新疆美利奴羊(细毛羊) 

 

   70年代起新疆从澳大利亚引进美利奴羊(澳美羊)来改良新疆细毛羊(50年代初期培育出的我国第一个细毛羊品种),育成了新疆美利奴羊(新美羊),又称中国美利奴羊(新疆型)。为了证实新美羊对OvLV的敏感性,本项目组申请到两项国家自然科学基金资助项目,采用实验感染和自然感染两个研究模式,历时8年。在实验感染研究中,试验1是用OPPV关节注射于受试新美羊的两侧腕关节囊内,感染后第12周宰杀,有3头出现淋巴细胞性滑膜炎/关节炎,发生率为33%(3/9),但无关节炎临床症状,属亚临床性感染。与美国学者的研究相比,本研究的感染剂量几乎大两倍,观察期(感染)长1倍,血清学阳性率和滑膜炎/关节炎发生率只有美国研究的1/3。试验2是用OPPV静脉内(5头)和乳腺内(4头)感染分娩后24 h内的新美母羊,感染后8~10个月宰杀。研究结果表明,在感染后2个月血清学转阳率只有11%,而美国学者的研究为50%;感染后10个月22%的实验羊为血清学阴性,而后者在感染后6个月全部血清学转阳。本研究所用的感染剂量比荷兰学者的研究大4倍,乳腺炎的发生率(40%)比荷兰研究的乳腺炎发生率(60%)低1/3。从以上试验研究的结果来看,新疆美利奴羊是对OvLV的低敏感性品种;并首次证实OPPV关节内感染引起细毛羊(新美羊)的滑膜炎/关节炎,可用做爱滋病关节炎的动物模式。在自然感染的研究中,从受感染的新美羊羊场选出血清学阳性(7头)和可疑(3头)老新美母羊2头阳性种公羊隔离饲养,供长期研究。用琼扩(AGID)试验检查受试羊血清中对OvLV的沉淀抗体,有70%的受试羊发生琼扩抗体类型转换,25%的受试羊在首次检查时只出现外线(对病毒核心蛋白p25的抗体),均为本研究的首次发现。几乎所有的靶器官均可分离到OvLV,病毒分离率依次为外周血白细胞膜层(90%)、乳腺(89%)、肺(50%)和脾(36%)。由于病毒可使细胞单层形成多核性合胞体(特征性CPE),接着细胞溶解,故属于OvLVⅠ型(溶解型)。分离到的OvLV证实为弱毒型,命名为绵羊慢病毒北疆(OvLVNXJstrain)。受试羊肺特异性病变(肺内淋巴滤泡增生)发生率为25%,淋巴细胞性乳腺炎的发生率为60%,证明乳腺是最敏感的靶器官。71%的病例有卵泡炎,系本研究首次发现。受试羊所在羊场OvLV流行的血清学阳性率平均为0.85%,5岁以上老羊为4.5%;美国绵羊OPPV血清学阳性率平均为26%,细毛羊(兰勃羊)为12%,5岁以上老羊可达35%,从血清学上证实新美羊为低敏感性品种。与国外同类研究相比,在肺特异性病变发生率上,差异却很显著。如法国自然感染绵羊肺内淋巴滤泡增生为100%;荷兰自然感染羊肺病变发生率为45%,美国自然感染羊肺病变发生率为43%,而自然感染新美羊的肺病变(淋巴滤泡增生)发生率为25%,故从病理学上亦证实新美羊为对OvLV的低敏感性品种。作者等在综述中已报道了这一研究成果。

 

3  新疆卡拉库尔羊(裘皮羊)

 

   本课题组对库车和阿克苏的1 631头新疆卡拉库尔羊进行了对OvLV感染的血清学调查,阳性率为1.3%;另一次调查的2 421头的阳性率为0.7%(王进成等1997),均与新美羊的血清学阳性率1.6%(采血8 702头)(王进成等,1997)和作者等的0.85%(采血1 075头)相近,而新美羊已证实为对OvLV的低敏感性品种,推测新疆卡拉库尔羊也是低敏感性品种。新疆卡拉库尔羊是以库车种羊场为中心,以卡拉库尔羊为父本,库车羊为主要母本,在终年放牧、冬季少量补饲的粗放饲养条件下,采用级进杂交方式育成的。1951-1960年共引进纯种卡拉库尔羊318只,后经4年横交固定,1979年正式命名为“新疆羔皮羊”,即新疆卡拉库尔羊。一般来说,采用杂交改良育成的品种,对OvLV感染的血清学阳性率要低于父本,这在边莱公羊与和田母羊的杂交改良中已得到证实,因此新疆卡拉库尔羊可能属于低敏感性品种。由国家自然科学基金资助的“新疆卡拉库尔羊对绵羊慢病毒的品种敏感性研究”正在进行中。

 

 

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